Idag träffades Daniela och jag i slussen klockan strax innan 8:00, för att ta saltsjöbanan som går 8:05 till KNC. Vi började med att planera hur vi skulle gå tillväga och hur mycket av olika ämnen vi skulle använda oss utav denna gång. Vår förra laborationsförsök var en test för att se att våra metoder fungerade, vilket visades fungera. Eftersom vår syfte med detta projektarbete är att ta reda på om det finns någon skillnad på olika tvålar, och hur bra dessa är, så bestämmde vi oss att kontaminera våra händer med större konsentration bakterier och mängd än innan.
Kurt Berndt förberedde bakterielösningen dagen innan, och spädd

e ut den innan vi kom för att uppnå större mängd bakterier än tidigare. Förrut hade han 1 bakteriekoloni i 15 ml näringsbuljong overnight i 37¤C, så att bakterierna kan föröka sig. Efter natten tog vi 1 ml av näringsämnet med bakterierna som vi tillsatte i 50 ml ny näringsbuljong. [För mer konkret information kolla
här! ] Denna gång tog Kurt en bakteriekolloni i 25 ml näringsbuljong som fick stå overnight. Imorse innan vi kom tog han *****25 ml (allt?)***** av näringsbuljongen med bakterierna och tillsatte i 50 ml ny näringsvätska som fick stå och växa i två timmar. När vi kom så hade bakterierna stått i inkubator på 37*C i ungefär 40 min.
Den 16 februari när vi var på KNC för att dokumentera resultatet och fotografera, kom vi på andra metoder vi kan använda oss utav. Den ena metoden kommer användas till att räkna koncentrationen av bakterier vilka vi kontaminerar våra händer med innan varje tvättprocedur. Den andra är den med centrifugröret som vi vände upp och den på handflatan som test 2, efter fingeravtrycken på agarplattan, har vi valt att inte odla på plattan. Utan låta dem växa i röret under natten, för att se om näringen har blivit grumlig. Har den det, så finns det bakterier efter en viss tvättprocedur, eller innan.
Process:
1) Vi formar 6 st glasplatinöser till fin trekantig form. Resultatet blev liite snyggare än förrut, men fortfarande blev många plattinöser fula i form. :)
2) Vi fyller 6 st centrifugrör med 950, 990 och 995 mikroliter av näringsvätska, i vilken vi senare tillsätter 50, 10 och 5 mikroliter av bakterier från bakterielösningen som har stått i inkubatorn. Detta för att: 950+50=1000 mikroliter = 1 milliliter osv.
3) 
Vi gör två spädningar som senare kommer användas till att räkna ut koncentrationen av bakterier vi hade på händerna.
a. Vi tillsätter i rör 1.0, 990 mikroliter näringsämne, till vilken vi sedan tillsätter 10 mikroliter bakterier från bakterielösningen.
b. Tillsätt 10 mikroliter från rör 1.0 till rör 2.0 (som är den andra spädningen)
c. Tillsätt 50 mikroliter från rör 1.0 till rör 1.2 (som innehåller 950 mikroliter)
d. Tillsätt 5 mikroliter från rör 1.0 till rör 1.1 (som innehåller 995 mikroliter)
e. Tillsätt 50 mikroliter från rör 2.0 till rör 2.2 (som innehåller 950 mikroliter)
f. Tillsätt 5 mikroliter från rör 2.0 till rör 2.1 (som innehåller 995 mikroliter).
4) Förbered centrifugrör ingör test 2 som kommer användas till handtvättning. Öka med två rör sen förra gången (tot. 18), för att vi skall göra ett test där vi bara sköljer bakterirna med vatten och torkar. Men allt annat är som innan.
5) Nu är det dags för tvättning! Alina tvättar händerna i 10-15 sek. Daniela tvättar händerna mellan 2-3 minuter. Vi låter händerna torka i 1-2 minuter, beroende hur blöta de är. Metoden är densamma som förut, som kan läsas
häär.
Innan vi börjar med tvätten, kontaminerar vi våra händer med 1 milliliter bakterielösning (till skillnad från förra gången då det var 0,5 milliliter). Vi sätter ett litet rör mot handflatan och sedan vänder upp och ned på handflatan 1o ggr för att bakterierna skall hamna i näringen. Sen sköljde vi händerna med vatten, lät det torka, däri vi gjorde samma test med en annan rör.
6) Vi börjar närma oss slutet. Markerar de sista plattorna med våra fingeravtryck att vi har använt dem. Vi tar 0,05 milliliter = 50 mikroliter av näringen med bakterierna som finns i rören 1.1; 1.2; 2.1 och 2.2 på två agarplattor som vi har "delar" mitt i, och smetar inom det markerade området med glasplattinöser vi formade i början.
Det hände lite misstag på vägen, pippeten slutade att fungera, antagligen för Alina gjorde något fel när man skulle suga upp bakterierna..
Förändringar var som sagt rätt många sedan sist, detta för att kunna ha fler bakterier på händerna bla. Är våra händer kontaminerade med fler bakterier , så är vår hypotes att vi kan få en mer synlig resultat hur bra tvålarna är. Då vi inte hade så många bakterier när vi gjorde testlabben, så blev det konstiga resultat.
Vi hittade även ett rör med ungefär 14 milliliter näring. Denna näring tänkte vi använda för att se om kaktvålen som vi använde för att tvätta händerna med, har kvar levande bakterier. Vi tog en sample med en glasplattinös från tvålen och satte i näringsvätskan så att bakterierna stannar där. Om de är levande kommer dessa att växa, tyvärr visar inte denna metod om det finns även döda bakterier.
Nästa vecka:
- Måndag runt 11:00 ska vi dokumentera och fotografera resultatet.
- Fortsätta att skriva på sina respektive delar till slutrapporten.
//Alina & Daniela